發(fā)布時(shí)間: 2013-06-01 人氣指數(shù): 5885
YMC-Pack Pro C18 RS說(shuō)明書(shū):它是一款具有高分離度,高耐久性的復(fù)合鍵合型高含碳量的ODS柱。
YMC-Pack Pro C18 RS系列在制造過(guò)程中進(jìn)行了嚴(yán)格的質(zhì)量管理,保證能為客戶提供最高品質(zhì)的產(chǎn)品。為了使供給您的色譜柱最大地發(fā)揮其性能并能夠長(zhǎng)時(shí)間使用,請(qǐng)認(rèn)真閱讀YMC-Pack Pro C18 RS說(shuō)明書(shū)正確使用。
一、YMC-Pack Pro C18 RS是一款具有高分離度,高耐久性的復(fù)合鍵合型高含碳量的ODS柱。其采用金屬雜質(zhì)含量極少的硅膠基質(zhì)進(jìn)行鍵合,與普通的色譜柱相比,本款色譜柱進(jìn)行了更高度的端基封尾處理,可用于包括堿性化合物在內(nèi)的,廣范圍的各類化合物的分離。
二、出廠時(shí)柱內(nèi)的保存溶劑
為乙腈/水(60/40)。如果色譜柱需要長(zhǎng)期保存,請(qǐng)置換為此溶劑。
三、流動(dòng)相(洗脫液)
a、從水性溶劑到非水性溶劑都可使用,但在極性極端不同的溶劑之間進(jìn)行反復(fù)置換后,分析柱性能可能會(huì)降低。
可以使用的有機(jī)溶劑為乙腈,甲醇,四氫呋喃(THF)等。
b、使用時(shí)請(qǐng)按照色譜柱標(biāo)簽上的箭頭方向來(lái)進(jìn)行通液操作。
c、通常流動(dòng)相的pH值請(qǐng)?jiān)趐H1.0 ~ 10.0 范圍內(nèi)進(jìn)行調(diào)制。
d、另外,在pH值臨界點(diǎn)附近,會(huì)有由于溫度,流動(dòng)相成分等條件使得色譜柱的壽命縮短。在pH值臨界點(diǎn)附近,請(qǐng)使用含有10%以上的有機(jī)溶劑的洗脫液。特別是pH9以上時(shí),請(qǐng)使用含50%以上的有機(jī)溶劑的洗脫液。
四、流動(dòng)相(洗脫液)的置換
Pro C18 RS與一般C18柱相比,由于采用了疏水性較大的填料,因此置換成有機(jī)溶劑比率較低的流動(dòng)相,以及平衡化時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)困難的現(xiàn)象。使用時(shí)請(qǐng)注意以下幾點(diǎn)。
a、如需置換流動(dòng)相,請(qǐng)注意有機(jī)溶劑之間的混合性和鹽的析出。
b、甲醇/水的洗脫液中甲醇的組成比在10%以下時(shí),保留時(shí)間的再現(xiàn)重復(fù)性可能不易得到。乙腈/水的洗脫液不會(huì)有此問(wèn)題。
c、改變洗脫液中的有機(jī)溶劑種類,從甲醇/水置換成乙腈/水時(shí),乙腈的組成比在20%以下時(shí),保留時(shí)間和峰形可能會(huì)出現(xiàn)異常。在這種情況下,請(qǐng)先用60%的乙腈水溶液進(jìn)行置換后,再置換成洗脫液。
五、色譜柱的清洗(一般方法)
a、洗脫液中不含緩沖液或鹽類物質(zhì)的情況下,請(qǐng)?zhí)岣邩?gòu)成洗脫液的有機(jī)溶劑的濃度,清洗柱內(nèi)保留的較大的物質(zhì),可用100%的有機(jī)溶劑進(jìn)行清洗。特別是當(dāng)脂溶性較高的成分被吸附在柱內(nèi)的時(shí),添加THF,有時(shí)也可取得比較好的效果。
b、洗脫液中含有緩沖液或鹽類物質(zhì)的情況下,先用不含此類物質(zhì)的水/有機(jī)溶劑混合液(與洗脫液同等配比)置換后,再使用上述方法進(jìn)行清洗。如果緩沖液或鹽的濃度為100mM左右,可直接用60%的乙腈水溶液等來(lái)進(jìn)行置換。
c、在pH值臨界點(diǎn)附近使用后,如只用水來(lái)清洗,可能會(huì)引起色譜柱的劣化。請(qǐng)置換成前面所提到的水/有機(jī)溶劑混合液或60%的乙腈水溶液。
d、如果蛋白質(zhì)或多糖類等高分子化合物附著在柱內(nèi),一般很難用清洗來(lái)去除附著物。如使用含有此類物質(zhì)或雜質(zhì)較多的樣品進(jìn)行分離時(shí),我們推薦對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理,或使用保護(hù)住。
六、其他的使用環(huán)境
a、柱壓在柱長(zhǎng)為150mm以下時(shí)為20MPa左右,250mm時(shí)25MPa為其上限基準(zhǔn)。但對(duì)于內(nèi)徑為10mm以上的半制備柱則以10MPa左右為上限基準(zhǔn)的參考值。
b、反復(fù)進(jìn)樣品后,柱壓可能會(huì)升高。如果發(fā)生這種情況,請(qǐng)使用YMC Duo-filter(0.2μm)等對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理過(guò)濾。另外對(duì)于易造成篩板堵塞的樣品請(qǐng)用柱前濾網(wǎng)(XRPRCS01)來(lái)進(jìn)行處理。
c、色譜柱的使用溫度上限為50℃,但由于流動(dòng)相的pH值等因素會(huì)影響到色譜柱的壽命,所以通常情況下請(qǐng)?jiān)?0℃~ 40℃范圍內(nèi)使用。
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